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在使用光学显微镜时，有几个关键的注意事项需要特别注意，以确保观察的准确性、设备的完好性以及操作者的安全。以下是一些主要的注意事项：

一、取放与安装

轻拿轻放：取放显微镜时动作一定要轻，切忌震动和暴力，以免光轴偏斜影响观察，同时保护光学玻璃免受损坏。

安装物镜：安装物镜时要特别小心，避免螺丝口损伤。先向左方倒转一小段，使凹凸双方吻合后再向右方旋转，不要转得太紧，轻轻捻到头，再稍紧即可。

二、观察步骤

镜检程序：观察时应严格按照操作程序进行，从低倍镜开始，看清标本后再转用高倍镜、油镜。使用油镜时，需在盖玻片上滴油后才能使用，并确保油镜使用完后及时将镜头、盖玻片上的油擦干净。

调节焦距：使用粗准焦螺旋和细准焦螺旋时，应先通过粗调找到物像，再用细调使物像清晰。使用高倍镜和油镜时，只能旋转细调焦手轮，不能使用粗调焦手轮。

叁、玻片与样品

玻片放置：放置玻片标本时，应将有盖玻片的一面向上，以免使用高倍镜和油镜时找不到物像，同时避免损坏标本和镜头。

样品保护：对于新鲜标本，观察时须加盖玻片，以防标本因蒸发而干燥变形或污染侵蚀接物镜。

四、光线调节

自然光源：利用自然光源镜检时，要用朝北的光源，避免直射阳光。

人工光源：利用人工光源时，宜用日光灯的光源，并根据需要调节反光镜和光圈以获得窜佳视野亮度。光线强时应使用平面反光镜，光线弱时应使用凹面反光镜。

五、安全与维护

操作安全：在使用过程中，要注意避免灯泡及其周围产生的高热，在灯亮或熄灭后30分钟内不要触摸，以免烫伤。

清洁保养：显微镜使用完毕后，应先将亮度调节钮调到窜低，然后关闭显微镜电源。待冷却后，罩好显微镜防尘罩，并定期用擦镜纸蘸少许二甲苯擦拭镜头和其他可能有油迹的部分。此外，要保持显微镜及存放环境的清洁，防尘、防潮、防酸碱等腐蚀物质的侵蚀。

规范使用：使用时不可用手摸光学玻璃部分，如需擦拭应严格按照光学部件擦拭办法进行。不得随意取出目镜或拆卸零部件，以防灰尘落入或丢失、损坏等。

六、其他注意事项

使用记录：及时记录显微镜的使用情况、性能、故障及解决办法，定期维修保养。

仪器保管：妥善保管好电源线及脚控开关以免损坏有关器件，使用完及时归位。

综上所述，使用光学显微镜时需要特别注意取放与安装、观察步骤、玻片与样品、光线调节、安全与维护以及其他细节方面的要求，以确保观察的准确性和设备的完好性。