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光学显微镜观察方式中的相称观察，通常指的是相差观察（Phase Contrast Observation），它是一种增加对比度的方法，可以在不染色的情况下看到活体细胞。以下是对相称（相差）观察的详细介绍：

一、原理

相称（相差）显微镜利用光的衍射和干涉现象，将透过标本的光线光程差或相位差转换成肉眼可分辨的振幅差。人的眼睛能够识别明与暗之差（光的强度）和颜色不同（光的波长不同），但难以识别差别小的无色的透明物体。光对无色透明物体（相位物体）并不引起明、暗和颜色的变化，而只产生所谓的相位差。可是这种相位差不能用肉眼识别，也就看不见这种相位物体。相差显微镜利用阿贝成像原理，把相位变化转化为振幅变化，是观察透明物体的关键。

相差光路比普通光学显微镜多了两个元件：环形光阑（annular diaphragm）和相位板（annular phaseplate）。利用位相差聚光镜及内部位相环所构成的环状光圈，产生中空光锥通过聚光镜、穿过检体，经过物镜内的光延迟位环板而成，因检体折射指数不同，造成绕射光束与直射光束发生干涉作用，得到明暗对比的效果。调整位相差装置，先选择聚光镜上与物镜相同倍率之位相差环，所形成的亮环与物镜内的暗环配合，调整聚光镜上亮环，使之重叠即可。

二、特点

无需染色：相差观察可以在不染色的情况下观察活体细胞，避免了染色过程对细胞的潜在损伤。

高对比度：通过相位差的转换，使得原本难以分辨的透明物体变得清晰可见，提高了图像的对比度。

广泛应用：相差观察广泛应用于生物学、医学等领域，特别是在细胞生物学、组织学、胚胎学等研究中发挥着重要作用。

叁、应用

细胞观察：相差显微镜能够清晰地观察细胞的形态、结构和动态变化，如细胞分裂、细胞运动等。

胚胎发育：在胚胎发育研究中，相差显微镜能够观察胚胎的形态变化、细胞分化和组织形成等过程。

组织切片：相差显微镜也适用于观察组织切片，特别是那些未经染色的透明组织切片。

四、注意事项

调整光路：在进行相差观察时，需要仔细调整光路，确保环形光阑和相位板的位置正确，以获得窜佳的图像效果。

选择合适的物镜：不同的物镜具有不同的放大倍数和分辨率，需要根据观察对象的大小和细节程度选择合适的物镜。

避免振动：相差显微镜对振动非常敏感，因此在使用过程中需要避免振动和干扰，以确保图像的稳定性。

综上所述，相称（相差）观察是光学显微镜中一种重要的观察方式，它能够在不染色的情况下清晰地观察活体细胞和透明物体，为科学研究提供了有力的工具。